微小RNA-145-5p调控视网膜β-catenin对小鼠眼轴的影响

目的：探讨miR-145-5p调控视网膜β - catenin表达对小鼠眼轴的影响。方法：取18只雄性3周龄C57BL/6小鼠按照随机数字表法随机分成对照组，miR-145-5p mimics组和miR-145-5p对照组。分组第2，5，8天双眼玻璃体腔注射1次药物，共注射3次：对照组小鼠玻璃体腔内注射3 μL枸橼酸盐缓冲液，miR-145-5p mimics组小鼠玻璃体腔内注射3 μL含有3 μg miR-145-5p mimics的枸橼酸盐缓冲液，miR-145-5p对照组采取同样方法注射3 μg miR-145-5p对照载体。最后一次注射完成3 d后A超测量小鼠眼轴长度，之后取小鼠视网膜组织，采用RT-PCR技术检测视网膜中miR-145-5p和β-catenin的表达，采用Western印迹法检测视网膜组织中β-catenin的含量。取6只成年雄性C57BL/6小鼠，构建β-catenin mRNA 3'UTR荧光素酶过表达载体，将β-catenin mRNA 3'UTR荧光素酶过表达载体与miR-145-5p mimics共同转染小鼠视网膜组织，3 d后取视网膜组织，应用荧光素酶报告基因技术检测和验证miR-145-5p与β-catenin的相关性。结果：视网膜转染miR-145-5p mimics后，小鼠眼轴长度降低，与对照组相比有显著性差异(P<0.05)，视网膜组织中miR-145-5p表达上升， β-catenin在mRNA和蛋白水平表达均下降(P<0.05)。视网膜转染miR-145-5p对照后，视网膜组织中miR-145-5p表达以及β-catenin的蛋白含量未见明显变化(P>0.05)；荧光素酶报告基因结果显示转染miR-145-5p和β-catenin mRNA 3'UTR荧光素酶过表达载体后，视网膜组织中荧光活性显著降低(P<0.001)。结论：miR-145-5p能够下调视网膜β-catenin的表达，进而控制眼轴增长。