SIRT1对氧化应激下人小梁网细胞功能的影响
摘要
目的：通过在人小梁网细胞(human trabecular meshwork cell，HTMC)中过表达沉默信息调节因子2相关酶1(silent information regulator 1，SIRT1)，探讨SIRT1对氧化应激下HTMC功能的影响。方法：将SIRT1过表达慢病毒和GFP阴性对照慢病毒按照最佳(multiplicity of infection，MOI)分别转染入HTMC，并用实时定量PCR法对SIRT1是否在细胞中过表达进行验证。实验分为以下4组：正常组、H2O2组、H2O2+Lv-SIRT1-OE(过表达)组、H2O2+Lv-GFP组，分别采用Transwell法和CCK8法检测氧化应激下HTMC的迁移能力和活性。两组间比较采用独立样本t检验。结果：在正常组、H2O2组、H2O2+Lv-SIRT1-OE组、H2O2+Lv-GFP组这4组中，Transwell实验结果分别为436±73、254±25、510±51、327±46，H2O2+Lv-SIRT1-OE组分别与H2O2组和H2O2+Lv-GFP组差异均有统计学意义(P<0.01)。CCK8法结果显示，H2O2+Lv-SIRT1-OE组分别与H2O2组和H2O2+Lv-GFP组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。H2O2+Lv-SIRT1-OE组分别与H2O2组和阴性对照组(H2O2+Lv-GFP)相比，Bax表达水平明显下降，Bcl-2表达水平明显提高，差异均有统计学意义(P<0.01)。ROS活性氧测定显示H2O2+Lv-SIRT1-OE组比H2O2组的细胞活性氧水平显著降低(P<0.05)。结论：在HTMC中过表达SIRT1能有效降低氧化应激对HTMC迁移能力和活性的影响，从而对HTMC起到一定的保护作用，为后续研究SIRT1保护氧化应激下HTMC的调控机制打下基础。
